Índice:
- Introducción.
- Enzimas de restricción.
- Separación de fragmentos.
- Secuenciación.
- Aplicaciones de la PCR.
1. INTRODUCCIÓN: Los seres humanos aún sin saberlo hemos estado mezclando moléculas del ADN desde tiempos remotos. Un ejemplo de ello se encuentra en las razas de los perros o de los cereales.
El ADN es fácilmente manipulable. En 1920 se desarrollan una serie de técnicas para poder manipularlo, a dichas técnicas se conoces con el nombre de Ingeniería Genética o Tecnología del ADN recombinante.
Hoy en día se puede obtener ADN de un organismo, modificarlo con un ADN de origen distinto e introducirlo en otro ser vivo para que se exprese.
2. ENZIMAS DE RESTRICCIÓN: sobre 1970 se desarrollaron unas enzimas en una bacteria termófila que atacaron al ADN extraño y lo cortaron en fragmentos (endonucleasas de restricción). Estas siempre cortan por la misma secuencia de ADN, produciendo siempre los mismos fragmentos.
- Consecuencias del corte: los fragmentos que originan poseen "extremos pegajosos" que se pueden pegar entre ellos.
3. SEPARACIÓN DE FRAGMENTOS: los fragmentos se pueden separar por electroforesis en gel de agorosa, debido a su movilidad eléctrica por carga eléctrica entre moléculas, los fragmentos se separan por tamaño al recibir descargas eléctricas y deslizarse por el gel de agorosa.
4. SECUENCIACIÓN: para este apartado se indica una página donde se explica la secuenciación y debido a que posee muchas aplicaciones en la criminología y/o aspectos actuales se prefiere añadir información a lo visto en clases.
http://es.wikipedia.org/wiki/Secuenciaci%C3%B3n_de_ADN#Automatizaci.C3.B3n_y_preparaci.C3.B3n_de_las_muestras
5. APLICACIONES DE LA P.C.R.: Reacción en Cadena de la Polimerasa:
- Clonar genes con distintas finalidades: médicas, económicas...
- Revolución de estudios evolutivos como la amplificación de genes de especies extintas.
- Avances en los estudios arqueológicos.
- Avance en la medicina forense.
La potencialidad de esta técnica es impresionante, a partir de una sola molécula de ADN, la PCR puede generar 100000 millones de moléculas idénticas en una tarde.
El ADN puede proceder de una muestra de tejido de un hospital, de una gota de sangre o semen en la escena de un delito, o de un cerebro momificado.
En esta animación puede verse simplificado el proceso:
http://www.arrakis.es/~ibrabida/igpcrani.gif Las dos hebras se separan, en cada hebra se fija una pequeña cadena de nucleótidos (el cebador o promotor, en color amarillo), que se fija sobre una parte concreta del ADN y a continuación empieza el proceso de la replicación. En unos segundos se completa el ciclo, y de un trozo de ADN, tenemos ya dos cadenas.
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